U wilt:
- een sequentie bepalen om mutaties te identificeren (puntmutaties (SNP's), inserties, deleties)
- de verwantschap tussen individuen of populaties evalueren
- de aanwezigheid van een bepaald organisme in een biologisch monster aantonen
- kloneren in een expressievector voor de synthese van een recombinante eiwit...
Deze analyses vereisen doorgaans een amplificatie van genetisch materiaal door een enzymatische reactie die PCR (Polymerase Chain Reaction) wordt genoemd. Deze reactie wordt meestal uitgevoerd op basis van DNA. Voor bepaalde specifieke toepassingen wordt als startmateriaal cDNA gebruikt, verkregen door reverse transcriptie van RNA.
Principe van de methode
De DNA-moleculen, in hun natuurlijke staat, bestaan uit twee complementaire strengen. Het verhogen van de temperatuur boven 94 °C leidt tot de scheiding van de twee strengen van het DNA en de vernietiging van de secundaire structuren (denaturatiefase).
De moleculen...